30U/uL hohe Konzentration an T4 DNA-Ligase

Produkt-Beschreibung

T4-DNA-Ligase, HC

Kategorie Nr./Spezifikation: E1014-D/5.000 Weiss U
Konzentration: 30 Weiss-Einheiten/μl

Beschreibung des Produkts
T4 DNA Ligase katalysiert die Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen nebeneinanderliegenden 5'-Phosphat- und 3'-Hydroxylterminen in doppelsträngiger DNA oder RNA.Dieses Enzym ist in der Lage, einseitige Spalten in doppelseitiger DNA zu reparieren., RNA oder DNA/RNA-Hybriden, und kann DNA-Fragmente mit klebrigen oder stumpfen Enden verbinden, ist aber an einzelsträngigen Nukleinsäuren inaktiv.
T4 DNA Ligase benötigt ATP als Cofaktor.

Aufbewahrung und Haltbarkeit
Aufbewahren bei -20°C. Die Gültigkeitsdauer des Arzneimittels beträgt 2 Jahre.

Quelle
Rekombinante E. coli-Stamm mit dem Gen 30, geklont aus Bakteriophagen T4.

Einheitliche Definition
Bei 37°C katalysiert 1 Weiss-Enzymeinheit innerhalb von 20 Minuten die Umwandlung von 1 nmol [32PPi] in einen Aktivkohlenstoffadsorptionszustand.
Die Enzymaktivität wird in der folgenden Mischung bestimmt: 66 mM Tris-HCl (pH 7,6), 6,6 mM MgCl2, 0,066 mM ATP, 10 mM DTT, 3,3 μM [32P] Orthophosphat (PPi).
Eine Weiss-Einheit entspricht etwa 200 kohäsiven Endligationseinheiten (CEU), was der Anzahl der HindIII-verdauten DNA-Fragmente entspricht, die innerhalb von 30 Minuten bei 16 °C ligatiert werden können.λ DNA-Fragmente.

Anwendungsbereich
- DNA-Fragmente, die durch Klon-Restriktionsenzyme erzeugt wurden
- Klonierte PCR-Produkte
- Bindung von doppelsträngigen Oligonukleotiden oder Adaptern zur DNA
- ortsgerichtete Mutagenese
- Amplifizierter Polymorphismus der Fragmentlänge (AFLP)
- Ligase-vermittelte RNA-Detektion
- Nick-Reparatur in doppelsträngigen DNA, RNA oder DNA/RNA-Hybriden
- Selbstzirkulation von linearer DNA